產(chǎn)品簡介：豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ELISA試劑盒

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：zui多可檢測90個樣本；48T/盒：zui多可檢測42個樣本

【保存條件】：2-8℃，避光防潮儲存

【檢測目的】：定性檢測

【實驗儀器】：酶標(biāo)儀

【檢測方法】：雙抗一步夾心法

【待檢樣本】：組織勻漿、細(xì)胞上清液、血清、血漿等

【特色服務(wù)】：免費代測ELISA實驗、支持定制

實驗所需自備試驗器材：

1.      酶標(biāo)儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

4.      蒸餾水或去離子水

96T豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ELISA試劑盒組成及其配置：

①微孔酶標(biāo)板（ 12 孔×8 條）；

②陰性對照 0.5mL；

③陽性對照 0.5mL；

④檢測抗體-HRP 10mL；

⑤20×洗滌緩沖液 25mL；

⑥稀釋液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨終止液 6mL；

⑩封板膜 2 張；說明書 1 份；自封袋 1 個.

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操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷：

 1.  試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；

                陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性

操作注意事項：

1.      嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2.      洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3.      消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4.      底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5.      避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6.      在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7.      平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8.      任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

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